western blot電泳的膠怎么放平

western blot電泳的膠怎么放平 | 時間: April-9 9:50:48 | 分類:技術欄目

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較近實驗室western blot電泳的膠做出來不夠平整，仔細思考一下實驗步驟，總結有一下幾個方面原因供大家參考

1)實驗用的玻璃板必須洗干凈

　　2)過硫酸銨和TEMED的加量不合適，加量較多時，凝膠凝固過快也會膠不平，較多按照分子克隆加倍

　　3)加完試劑以后沒有很好的搖勻，導致有些部位的聚合劑濃度過高，聚合相對較快造成膠不平；

　　4)稍微注意手法，均勻加入

　　5)灌膠后應該用水或者正丁醇壓膠面或用20%的乙醇封頂(沒有毒性可以除氣泡，使用效果極好）。

　　6)邊緣膠是不容易聚合完全的，灌完膠后要立即加無水正丁醇覆蓋，濃度越低的膠越不要使用雙蒸水壓頂，另外還可以在壓頂試劑如正丁醇中添加少許AP來增加邊緣膠的凝聚強度

　　7)溫度也是影響膠聚合的重要因素，有些同事為了讓膠更快的凝固而把膠放到50度的溫箱，由于受熱不均勻，造成膠聚合不均勻。