RNA電泳如何得出漂亮的條帶

RNA電泳如何得出漂亮的條帶 | 時(shí)間: April-3 18:32:08 | 分類:技術(shù)欄目

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方法改進(jìn):

1.電泳槽,制膠器,梳子等的清洗:去污劑浸泡過夜——>自來水沖洗干凈——>ddH20 沖洗——>3%H2O2 灌滿浸泡過夜——>滅活的 0.1%DEPC水沖洗干凈——>超凈臺(tái)內(nèi)紫外線照射過夜.

2.燒瓶,燒杯,藥匙,量筒等制膠器械的清洗:0.1%DEPC 水浸泡過夜后高壓消毒滅活,烘箱烘干.或者 ddH20 清洗干凈, 超凈臺(tái)內(nèi)紫外線照射過夜.

3.電泳緩沖液必須是 RNase free.

4.預(yù)電泳 5-10min 減少了非特異 RNA 條帶的出現(xiàn),有利于分離和純化,同時(shí)可根據(jù)電泳儀是否冒泡判斷電泳儀裝置是否有誤.

5.樣品是在電泳緩沖液液略低于膠表面而不是在高過膠面時(shí)加進(jìn)齒槽,避免了加樣時(shí) RNA 的擴(kuò)散,加樣后 RNA 從齒槽逸出造成 RNA 的彌散及定位不良等現(xiàn)象.

6.電泳 3-5min 讓 RNA 進(jìn)入凝膠后再加電泳緩沖液液高過表面,確保了加到每個(gè)槽中的 RNA 量及定位的準(zhǔn)確性,從而有利于 DNA 的鑒定和純化.