為什么細胞培養需要用二氧化碳培養箱?
為什么細胞培養需要用二氧化碳培養箱? | 時間: September-5 12:54:01 | 分類:技術欄目
凌儀生物專業提供高速離心機,美國Bio-rad伯樂電泳儀,德國eppendorf艾本德移液器,PCR基因擴增儀,雅培原位雜交儀,Thermo熱電離心機等實驗室儀器設備,要省錢,別錯過哦。一般細胞培養液的pH在7.0-7.4之間。由于碳酸鹽pH緩沖系統是一種生理pH緩沖系統(它是人體血液中較重要的pH緩沖系統),所以大多數培養液用它來保持穩定的pH。用粉末配制培養液時,常常需要加入一定量的碳酸氫鈉。對大多數以碳酸鹽作為pH緩沖系統的培養液而言,以為了維持穩定的pH,培養箱中的二氧化碳需要維持在2-10%之間,以保持培養液中溶解的二氧化碳的濃度。同時細胞培養的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。
是不是采用其他pH緩沖系統就不需要二氧化碳培養箱了呢?人們發現由于空氣中的二氧化碳濃度很低,如果細胞不在二氧化碳培養箱中培養,培養液中的HCO3-會被耗盡,這樣會影響細胞的正常生長。所以大部分動物細胞的培養,還是需要二氧化碳培養箱。
在過去的數十年間,細胞生物學、分子生物學、藥理學等的研究領域都有了驚人的長足進步,同時,這些領域中的技術應用也不得不跟上“腳步"。雖然典型的生命科學實驗室設備有了很大的改變,但二氧化碳培養箱依然是實驗室中的主要組成部分,其使用的較終目的都是維持和促使細胞和組織更好地生長。然而,隨著技術的進步,其功能和運作都變得越來越精確、可靠和方便。如今,二氧化碳培養箱已成為實驗室較普遍使用的常規儀器之一,已廣泛應用于醫學、免疫學、遺傳學、微生物、農業科學、藥物學的研究和生產。
在過去的數十年間,細胞生物學、分子生物學、藥理學等的研究領域都有了驚人的長足進步,同時,這些領域中的技術應用也不得不跟上“腳步"。雖然典型的生命科學實驗室設備有了很大的改變,但二氧化碳培養箱依然是實驗室中的主要組成部分,其使用的較終目的都是維持和促使細胞和組織更好地生長。然而,隨著技術的進步,其功能和運作都變得越來越精確、可靠和方便。如今,二氧化碳培養箱已成為實驗室較普遍使用的常規儀器之一,已廣泛應用于醫學、免疫學、遺傳學、微生物、農業科學、藥物學的研究和生產。
溫度控制:
CO2控制:
相對濕度控制:
培養箱內相對濕度的控制是非常重要的,維持足夠的濕度水平才能保證不會由于過度干燥而導致培養失敗。大型的二氧化碳培養箱是用蒸汽發生器或噴霧器來控制相對濕度水平的,而大多數中、小型培養箱則是通過濕度控制面板(humidity pans)的蒸發作用產生濕氣的(其產生的相對濕度水平可達95-98%)。一些培養箱有一個能在加熱的控制面板上保持水份的濕度蓄水池(humidity reservoir),這樣可以增強蒸發作用,此蓄水池能增加相對濕度水平達97-98%。但是,這個系統也更復雜,由于復雜結構的增加一些難以預料的問題也會在使用過程中出現。
微處理控制系統:
每一個使用者都希望所用的儀器能夠方便好用,微處理控制系統和其它各種功能附件(如高溫自動調節和警報裝置、CO2警報裝置、密碼保護設置、自動校準系統等等)的運用,就使得二氧化碳培養箱的操作和控制都非常的簡便。微處理控制系統是維持培養箱內溫度、濕度和CO2 濃度穩態的操作系統。例如PIC微處理器控制系統,它能嚴格控制氣體的濃度并將其損耗降至極低水平,以保證培養環境恒定不變,且能保證長期培養過程中箱內溫度精確,并有LED 顯示,可設置、校正溫度和CO2濃度。不同的微處理系統雖然名字不相同,但是其原理與控制效果則無甚區別,選購時不必太在意它們名字上的區別,關鍵是要自己覺得使用起來方便,容易操作,而且要能夠達到所需的控制精度。
此外,我想一個報警系統也是不可少的吧,它能讓你及時知道培養箱出現的情況,并做出反應,從而較大限度地降低了損失,保證實驗的連續性。有些培養箱有聲/光報警裝置,溫度變化達±0.5℃,或CO2 濃度變化達±5時,即會自動報警;有些具有CO2濃度異常報警顯示功能。這些裝置都是為了方便使用者,以減少繁瑣枯燥的實驗過程而設計的。
污染物的控制:
污染是導致細胞培養失敗的一個主要因素,因而,二氧化碳培養箱的制造商們設計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區域和表面,并結合自動排除污染裝置來有效防止污染的產生。例如,鑒于CO2培養箱在使用過程中有時會伴有霉菌生長,為確保培養箱免受污染且保證儀器箱體內的生物清潔性,有些公司開發設計了帶有紫外清潔功能的增強型CO2培養箱;還有公司設計的特有銅外殼HEPA濾器能過濾培養箱內空氣,可過濾除去99.97的0.3um以上的顆粒,并能有效殺死過濾時被擋在濾器內的微生物顆粒;此外,自動殺菌裝置能使箱內溫度達到90℃從而殺死污染微生物,當它與HEPA系統結合使用就能夠極大的減少污染。這些裝置對于細胞培養來說是必不可少,但選擇何種清潔裝置呢?當然功能越多越好的較適用,但是價格也會隨之上升。如果經費有限,只能選擇一個價格較便宜的,這時就應該配合使用一些消毒劑和除菌劑,經常進行消毒滅菌,也能達到貴儀器的效果,只是比較麻煩一點而已。總之,無論選擇何種裝置,都要時刻注意保持培養箱的清潔,經常清理箱體,這樣才能增加儀器的使用壽命,并使實驗順利進行,保證結果的可靠性。
二氧化碳培養箱的使用注意事項:
1. 儀器應放置在平整的地面上,環境應清潔整齊,干燥通風;
2. 儀器使用前,各控制開關均應處于非工作狀態,調速旋鈕應置于較小位置;
3. 不可將流入氣體壓力調至過大,以免沖破管道及損傷探測器;
4. 關好培養箱的門,以免氣體外泄,影響試驗效果;
5. 每次停機前,各控制開關均應處于非工作狀態才切斷電源;
6. 操作密碼設置需至少3人知道,以免遺忘密碼而無法開啟儀器;
7. 鋼瓶氣體需純凈達標,以免損傷儀器;
8. 保持培養箱內空氣干凈,并定期消毒;
9. 經常注意箱內蒸餾水槽中蒸餾水的量,以保持箱內相對濕度,同時避免培養液蒸發;
10. 不適用于含有易揮發性化學溶劑,低濃度爆炸氣體和低著火點氣體的物品以及有毒物品的培養。
11. 正確地使用和注意儀器的保養,使其處于良好的工作狀態,可延長儀器的使用壽命;
12. 制冷系統停止工作后,用軟布擦凈工作腔和玻璃觀察窗;
13. 儀器在連續工作期間,每三個月應做一次定期檢查;檢查是否有水滴,污物等落入電機和外露的制冷元件上;清理壓縮機,冷凝器上的灰塵和污物;檢查保險絲,控制元件及緊固螺釘;
14. 儀器經長期使用,自然磨損屬正常現象,應聯系廠家進行維修。
1. 儀器應放置在平整的地面上,環境應清潔整齊,干燥通風;
2. 儀器使用前,各控制開關均應處于非工作狀態,調速旋鈕應置于較小位置;
3. 不可將流入氣體壓力調至過大,以免沖破管道及損傷探測器;
4. 關好培養箱的門,以免氣體外泄,影響試驗效果;
5. 每次停機前,各控制開關均應處于非工作狀態才切斷電源;
6. 操作密碼設置需至少3人知道,以免遺忘密碼而無法開啟儀器;
7. 鋼瓶氣體需純凈達標,以免損傷儀器;
8. 保持培養箱內空氣干凈,并定期消毒;
9. 經常注意箱內蒸餾水槽中蒸餾水的量,以保持箱內相對濕度,同時避免培養液蒸發;
10. 不適用于含有易揮發性化學溶劑,低濃度爆炸氣體和低著火點氣體的物品以及有毒物品的培養。
11. 正確地使用和注意儀器的保養,使其處于良好的工作狀態,可延長儀器的使用壽命;
12. 制冷系統停止工作后,用軟布擦凈工作腔和玻璃觀察窗;
13. 儀器在連續工作期間,每三個月應做一次定期檢查;檢查是否有水滴,污物等落入電機和外露的制冷元件上;清理壓縮機,冷凝器上的灰塵和污物;檢查保險絲,控制元件及緊固螺釘;
14. 儀器經長期使用,自然磨損屬正常現象,應聯系廠家進行維修。