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實驗中提取質粒DNA時的注意點

實驗中提取質粒DNA時的注意點 | 時間: May-15 16:07:06 | 分類:技術欄目

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     提取質粒的時候,較后一步的酒精揮發很關鍵,基本上是其后續的酶切反應的決定性因素。所以這一步盡量揮發長一點時間,較好是空調吹熱風,或是37度溫箱放長一點的時間,我試過室溫過夜,酶切很好。

 將amp濃度提高到200ug/ml,下班前接種,次日一早收獲菌體,此時OD雖然不高,質粒豐度卻不一般。菌體量少些,操作體積(管數)也小(少)。
 
 手提質粒,如果用氛氯仿和氯仿兩步抽提,再注意一下手法,嚴格按照參考書上面的操作的話,提出的質粒不比任何質粒提取試劑盒差,我感覺好像還好一點,我就用過一次試劑盒,比較了之后不如我手提的好,以后再也沒用過了。

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