Western-blot電泳制膠時(shí)出現(xiàn)好多泡泡該怎么辦
Western-blot電泳制膠時(shí)出現(xiàn)好多泡泡該怎么辦 | 時(shí)間: April-30 21:15:01 | 分類:技術(shù)欄目
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1）首先，玻璃板一定要洗干凈，用洗潔凈洗，沖干凈后再用雙蒸水沖一，晾干。配膠的時(shí)候沿管壁緩緩加入各個(gè)成分，混勻的時(shí)候用手輕輕搖勻，如果用槍吹打時(shí)要緩慢且不要打到頭。
2）配膠時(shí)混勻要輕，盡量不產(chǎn)生氣泡，上膠時(shí)要快，槍也不打到底。加完分離膠后用雙蒸水封，待其凝固。即使在上膠時(shí)液面上有氣泡，加水后也會(huì)浮上來(lái)。分離膠凝好后，倒掉里面的水，用吸水紙吸干，再加濃縮膠，迅速插梳子。
3）倒膠的時(shí)候，用1ml的槍沿一側(cè)緩緩加入，不要打到頭，以免帶入氣泡！
4）將膠在小燒杯里配好后，將電泳槽略微傾斜，將燒杯的嘴靠在玻璃邊緣，直接倒進(jìn)去，速度快，而且不容易產(chǎn)生氣泡，不妨試試
5）用雙蒸水封時(shí)建議用200ul的槍加水，這樣壓力小，以免把膠沖起來(lái)！
6）國(guó)產(chǎn)的只能是緩慢加樣，別把氣泡加進(jìn)去。如果加進(jìn)去了，小心把整個(gè)板在桌上敲敲可以讓氣泡浮上來(lái)。
7）分離膠中的氣泡與插梳子有關(guān)，垂直插容易產(chǎn)生氣泡，且不容意排除。將梳子傾斜5-10度插入，即使產(chǎn)生氣泡也可以也可以通過(guò)輕輕晃動(dòng)梳子使氣泡從一側(cè)逸出。
8)pinghw還有一個(gè)制膠起泡泡的原因，就是配膠的液體全部在四度存放，室溫制膠時(shí)由于溫差及凝膠聚合反應(yīng)放熱的關(guān)系，液體中微小的氣泡在凝固的凝膠中也會(huì)放大成可見(jiàn)的較大的泡泡，這種情況在夏天室溫較高時(shí)更容易出現(xiàn)。避免的方法是將制膠成分中除催化劑外的部分配置后放室溫下靜置一會(huì)兒，減小溫差后再加入催化劑制膠。
